菊花种苗矮化试管繁殖研究

 

以开封菊花试管苗为材料,分别设计6-BA、IBA、NAA各4个水平，通过正交试验来研究外源激素对矮化菊花试管苗生长的影响，结果表明对矮化试管菊花苗快速繁殖影响最大的是外源生长素的含量，在只添加细胞分裂素的培养基中外植体无法分化出芽体。适合矮化菊花试管苗快繁的最佳外源激素组合为1_5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA。

 

 

菊花属菊科菊属，原产我国，多年生宿根草本植物。株高20-200 cm,通常为30-90 cm。茎嫩绿色或褐色，直立分枝，基部半木质化。单叶互生，卵圆至长圆形，边缘有缺刻及锯齿。头状花序顶生或腋生,1朵或数朵簇生。因其具有较髙的观赏价值,我们从2006年起做了一系列的研究,已经获得了菊花耐盐的菊花试管苗和矮化试管菊花种苗。本试验通过正交设计对菊花苗矮化试管化快繁进行研究，以期为菊花种苗矮化试管产业化提供试验依据。

1材料与方法

1.1材料

试验用材料为侯仁浩等[4]经过矮化获得的试管菊花苗。将其在齐向英等筛选的MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+0.01 mg/L TDZ中培养25 d作为试验用材料。

1.2方法

实验设计:以MS培养基为基本培养基、附件52 g/L琼脂和20g/L蔗糖。6-BA、IBA、NAA为外源激素。分别设置6-BA 1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0和2.5 mg/L 4个水平;IBA 0 mg/L、0.25 mg/L、0.5 mg/L和0.75 mg/L 4个水平;NAA浓度0.1 mg/L、0.075 mg/L、0.05 mg/L、0 mg/L。

将矮化试管菊花苗修剪成2.0 cm含茎尖,接人继代培养基中，在光照强度（1 700±200)lx、光照时间12 h/d、湿度65%~80%条件下培养。以培养30 d的数据来作试验分析。每个处理随即抽取30个外植体做统计分析。

2结果与分析

在培养后10 d,矮化试管菊花苗在继代培养基中F5中最先分化出芽体，芽体呈簇生状态，随着培养时间的增加簇生的幼苗逐渐展开，形成有茎形态的无根试管菊花苗。从培养后15 d开始，除F13外的其余培养基中均陆续不断地分化出丛生芽。直到培养结束,F13中始终没有分化出任何芽体。F3、F4和F14的分化能力较弱，繁殖系数均没有达到4 以上,其中F5的繁殖系数达到9.66。

6-BA对矮化试管菊花苗继代培养的影响

随6-BA浓度的增大，矮化试管菊花苗的繁殖系数呈现先升髙后降低的趋势,其中在6-BA为1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L时繁殖系数分别为4.54 5,6.972 5、6.112 5、4.577 5。在6-BA浓度为1.5 mg/L时最大,6-BA浓度为1.0 mg/L时最小，极差为2.427 5。

IBA对矮化试管菊花苗继代培养的影响

随IBA浓度的增大,矮化试管菊花苗的繁殖系数一直呈现降低的趋势。在IBA浓度为0、0.25、0.5、0.75 mg/L时，矮化试管菊花苗的繁殖系数分别为6.44,5.707 5、5.655、

姜贝贝，房伟民，陈发棣,等.氮磷钾配比对切花菊‘神马’生长发育的影响[J].浙江林学院学报,2008,25(6):692-697.

朱亚飞.SPAD值用于小麦氮肥追施诊断的研究[D].扬州：扬州大学,2008:9-18.

莫丹,陈发棣,徐迎春,等.定植期和摘心次数对小花型盆栽夏菊开花的影响[J].南京农业大学学报,2008,31(3)：51-54.

董薇，练云,余永亮,等.大豆憐胁迫响应研究进展[J].大豆科学,2012,31(1):135-140.

柴仲平,王雪梅,孙霞，等.氮、磷、钾施肥配比对红枣光合特性与水分利用效率的影响研究[J].干旱区资源与环境,2011(2)：144-150.

3讨论

花卉的组培和快繁一直是花卉生产的重点，菊花的组培快繁研究较多。梁称福等[5]在大头菊上组培的结果表明,在MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA、MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA、MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA的增殖培养基上培养2?d后芽增殖3.65-5.90倍;但其接种的个数太少，仅有20个外植体。任旭琴等[6]以千头菊为材料发现较高浓度的6-BA能促进芽的形成，在2.0~3.0 mg/L 6-BA之间的腋芽生长速度最快，长度可以达到1.6 cm;并且发现较髙浓度的NAA会抑制芽的形成。这与本研究中IBA的结论相似。邓年方等⑺以菊花花瓣建立无性系,在快繁中发现6-BA和NAA对促进愈伤组织诱导、丛生芽的形成具有显著的效果，诱导愈伤组织和丛生芽的最佳培养基是MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,以IBA作为外源激素的诱导能力低于用NAA。张红以绿牡丹的幼嫩枝建立无性系后发现丛生芽增殖培养的最佳培养基为MSi+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。刘忠荣w对菊花的组培快繁做了综述，认为菊花继代快繁可以用初代培养中较好的培养基。王康才等[1°]对杭菊花(大白菊、小白菊、黄菊）始花期花蕾的花瓣做组培研究的结果表明，以MS+0.2 mg/L NAA+2 mg/L KT培养基较好，培养40 d后芽分化率为72.2%~81.8%。刘鹏等[11]以陕西的九月菊为材料研究发现,IAA与6-BA的配比对菊花有促进生长的作用,而低浓度的NAA或IAA与6-BA配比使菊花的生长滞化，甚至死亡。刘兴玉等〖121以菊花花瓣为外植体的研究发现MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA最适合继代培养。本研究的结果表明矮化试管菊花苗最适继代培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,与上述研究的差别可能是外植体不同引起的。

参考文献：

吴国芳,冯志坚,马炜梁.植物学:下册[M].    2版.北京:高等教育出版社,1992:325-329.

齐向英,郑丹,张超,等.菊花组织培养研究[J].江苏农业科学,2009(5):63-64.

徐小军，贺明，田刘刚，等.NaCl对试管菊花苗生长影响研究[J].湖北农业科学，2010,49(11)：2817-2818.

侯仁浩，齐向英，陈宗礼，等.多效唑与矮壮素对试管菊花苗生长的影响[J]?江苏农业科学,2012，40(1):16-162.

梁称福，易诚，范适，等.菊花组培快繁技术研究[J].湖南环境生物职业技术学院学报，2006,12(3)：242-244.

任旭琴，单志娟.菊花组培快繁系统的优化研究[J].安徽农业，2004(12)：15-17.

邓年方，吴桂容：菊花花瓣的组培快繁技术研究[J].贺州学院学报，2007，23(3):144-145.

张红.菊花珍品绿牡丹的组培技术研究[J].北方园艺2008(3)-.195-196

刘忠荣.菊花组培快繁[J].中国花卉盆景，2003(8)    :36-37.

王康才，张雪琼，茅毓英?杭菊花花瓣组织培养[J].中草药，2000,31(8)：628-630.

刘鹏，刘金，赵艳红，等.菊花的组织培养、脱毒与快繁技术研究[J].内蒙古民族大学学报：自然科学版，2005,20(4)：410-413.

刘兴玉，蒲红.菊花花瓣的组织培养[J].西南农业大学学报，1990，12(2):203-206.

 

开封市园林菊花研究所